10天大的克隆基因狗“鲁皮”皮下可见红色蛋白

10天大的克隆基因狗“鲁皮”在紫外线下发红色荧光

两头的小狗有红色荧光基因，中间这只狗没有这一基因

据英国《新科学家》杂志报道，韩国科学家日前成功克隆出首批发荧光的猎兔犬，堪称是世界上第一批转基因实验狗，其中名为“鲁皮”(鲁比·普皮的缩写)就是这5只克隆猎兔犬中的一只，它们都产荧光蛋白，在紫外光线都发红色荧光。这一创新成果发表在最新出版的《起源》杂志上。

韩国首尔国立大学李炳春领导的一支科研小组通过克隆成纤维细胞成功培育出这些猎兔犬，而成纤维细胞可表达由海葵产生的红色荧光基因。2005年，李炳春和干细胞研究专家黄禹锡共同参与了世界首只克隆狗——“史努比”的研究工作，虽然媒体披露黄禹锡关于人体细胞的研究多属欺骗行为，但后来经证实克隆狗史努比确实是真实的。该小组下一步将培育用于真实治疗人类疾病的转基因实验狗。

目前，狗已作为一些人类疾病的动物研究模型，比如：嗜眠病、某些癌症和失明。狗的基因改良使这类动物成为科学家研究人类疾病的更为有用的研究模型，便于科学家查找导致疾病的根源性基因，因此转基因实验狗将会广泛应用于人类疾病研究中。如今，大多数从事狗基因研究的科学家其研究工作局限于筛查从数百只宠物狗中获得的DNA的基因。

李炳春小组首次通过染病狗的成纤维细胞克隆出了“鲁皮”，其具体办法是：先将病毒植入成纤维细胞内，同时在成纤维细胞核内注入荧光基因，之后将这些成纤维细胞核转换狗的卵细胞的细胞核。在培养皿里培育分裂一周之后，研究人员将该克隆晶胚植入代孕狗妈妈体内。研究人员一共将344个克隆晶胚植入20只母狗体内，最终7只母狗怀孕。接下来，一只胚胎狗在怀孕期间死亡，另一只怀孕已11周的胚胎狗因狗妈妈胸部意外受伤导致它得肺炎而死。最终有5只小猎兔犬健康地生了下来，都能发荧光，成功率仅1.7%。

克隆狗除了低成功率之外，另一大挑战就是培育转基因实验狗受控于外部基因着陆其细胞核DNA的位置。李炳春小组使用一种逆转录酶病毒将荧光基因植入狗的成纤维细胞，但他们无法控制这些病毒插入此基因的位置。这就能防止研究人员避免培育出缺少特殊基因或基因变异的实验狗。这些手段目前广泛应用于老鼠的克隆中，为此，三名研究人员因开发这种“基因打靶”技术而获得2007年的诺贝尔奖。